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专论2018, 43(4): 363-372.2017年美国食品药品监督管理局(FDA)批准上市新药46个，其中有抗菌药物4个，抗病毒药物3个。本文根据FDA批准的新药说明书以及相关文献和专利情况，简要介绍德拉沙星(delafloxacin)、复方美罗培南(meropenem)、塞克硝唑(secnidazole)、奥泽米星(ozenoxacin)、复方三联抗丙型肝炎制剂(vosevi)、复方抗丙型肝炎制剂(mavyret)和莱特莫韦(letermovir)的药物的概况、合成技术路线、适应症、作用机制、剂型规格、不良反应和合成路线等相关情况。严格来说，塞克硝唑(secnidazole)是一仿制药物，在欧洲已经上市近30年，在中国上市也有10年以上。
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综述2018, 43(4): 373-379.中国药典2020年版的增修订工作已经启动。本文针对大环内酯类抗生素的特点，在进一步解读中国药典2015年版变化的基础上，提出对其进一步进行修订的重点。鉴于大环内酯类抗生素具有组分/杂质谱复杂之特点，增修订中应关注对大环内酯类抗生素中组分/有关物质，特别是与工艺相关的特定杂质的控制；而开发具有高专属性的HPLC方法，保证分析方法具有理想的重复性和粗放性，方便地实现对样本中各组分/杂质的快速定位，仍是方法学研究的重点。
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综述2018, 43(4): 380-386.自1962年第一代喹诺酮类药物萘啶酮酸发明以来，成百上千种可分为四代的喹诺酮衍生物已经被成功合成，并且细菌IIA型拓扑异构酶(DNA旋转酶和拓扑异构酶IV)已经被确认为该类抗菌药物的作用靶点。先前研究表明：细菌DNA复制过程对菌体生长与存活至关重要，而这一过程需要DNA旋转酶和拓扑异构酶IV的共同作用。在过去50多年中，喹诺酮类药物的广泛使用也说明这一药物作用靶点在临床治疗上的重要性；但是由于对喹诺酮类药物不恰当的使用乃至滥用，导致细菌耐药性的逐步上升，为确保这一行之有效的抗菌药物作用靶点继续发挥其良好的治疗效果，研发作用于该靶点的非喹诺酮类抗菌药物来克服现有的喹诺酮耐药迫在眉睫。
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综述2018, 43(4): 387-393.细菌分泌系统的发现是近年来细菌致病机制研究的重点。致病菌为在宿主体内生存、繁殖、扩散，会分泌一些蛋白性质的毒性因子。目前认为革兰阴性致病菌在长期进化过程中形成入侵宿主细胞的特异性分泌系统共有5种类型(I~V型)，其中最显著的是细菌Ⅲ型分泌系统(type three secretion system, T3SS)，与细菌致病性密切相关。T3SS抑制剂的策略是细菌分泌毒力蛋白，阻止其对宿主细胞的侵染。本文对细菌T3SS的组成、T3SS抑制剂筛选系统、T3SS抑制剂以及作用机制等进行综述，为深入研究以T3SS为靶点的药物设计提供参考。
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综述2018, 43(4): 394-400.抗生素发现“黄金时代”的结束以及日趋严重的抗生素耐药性问题给我们留下一个戏剧性的、缺乏新型药物来防治耐药病原体感染的难题。这使得从现有非抗生素药物中筛查抗菌活性药物成为一种新尝试。近期研究表明：美国食品药品监督管理局(FDA)批准的、本来用于治疗高血钙的药物硝酸镓具有良好的抗菌活性。不同于其他抗生素，镓的药理性质依靠化学拟态，它可以在目标酶分子中取代铁，从而干扰、扰乱细菌含铁蛋白的功能及细菌代谢，无论是在体外实验还是在体内实验中，镓对多种病原体，包括多重耐药病原体都表现出杀菌活性。因此一些含镓制剂有望被开发成有潜力的非传统抗菌药物，帮助治疗多重耐药细菌感染。
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综述2018, 43(4): 401-407.固态核磁共振技术作为一种重要的分析研究手段，在有机化学、无机化学和材料化学等许多研究领域都有广泛的用途。本文结合具体实验方法和实例，重点介绍了该技术在固态药物分析技术的应用。
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综述2018, 43(4): 408-414.近年来的研究发现，细菌应答抗生素压力时会产生特异的非编码小RNA(small RNA, sRNA)谱，进而可能调控下游基因的表达，帮助细菌克服抗生素压力。sRNA以各种方式调控细菌耐药相关基因(如抗生素转运蛋白、药物外排泵、细胞被膜的合成与修饰)，参与细菌耐药网络。因此，sRNA及其相关因子(如Hfq)可能被用作抗菌治疗的靶标。本文将从sRNA应答抗生素压力并产生抗生素耐药及其作为药物靶点的前景等方面，综述sRNA在细菌耐药调控方面的研究进展。
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微生物药物筛选2018, 43(4): 415-423.目的 从印度洋深海沉积物中分离可培养海洋放线菌，对获得的一株海洋微生物进行抗革兰阴性菌活性物质研究。方法 设计11种分离培养基进行海洋放线菌分离，通过16S rRNA基因序列比对分析确定菌株分类；利用多种色谱方法，对菌株IMB16-059产生的活性物质进行分离纯化，通过波谱学和化学方法鉴定其结构。 结果 根据菌落表型共分离得68株微生物，经16S rRNA分析表明，其中34株属于放线菌门，覆盖5科5属；其余属于厚壁菌门和变形菌门。25株发酵产物显示出抗革兰阴性菌活性。从赤杆菌IMB16-059中分离鉴定了6个化合物，其结构分别确定为L,L-环(脯氨酸-丙氨酸)(1)，L,L-环(脯氨酸-酪氨酸(2))， D,L-环(脯氨酸-酪氨酸)(3)，邻氨基苯甲酸(4)，胸腺嘧啶(5)，1H-喹啉-4-酮(6)。化合物1和4显示出抗铜绿假单胞菌活性，在样品浓度为20μg/片时，抑菌圈直径分别为13和20mm。结论 印度洋深海沉积物蕴含丰富的微生物类群，其发酵产物显示出较好的抗革兰阴性菌活性，可为新抗生素发现提供重要的菌种资源。
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微生物药物筛选2018, 43(4): 424-428.目的 对湖泊放线菌SIIA-A16124进行分类鉴定和基因组挖掘。方法 采用多相分类法对菌株的形态学、生理生化、细胞壁化学组分、16S rRNA基因序列进行测定和分类鉴定，采用基因组挖掘分析生物合成基因簇，经发酵培养、抗菌活性检测及活性产物质谱分析，推测其活性产物的化合物结构类别。结果 菌株SIIA-A16124的16S rRNA基因与菌株Actinokineospora inagensis NRRL B-24050T同源性最高为99%；菌株SIIA-A16124在ISP3培养基上中等产孢和水解淀粉的特性与模式菌株存在明显差异；鉴定菌株SIIA-A16124为动孢菌Actinokineospora sp.，具有羊毛硫肽生物合成基因簇，其活性次级代谢产物属于羊毛硫肽类抗生素。结论 首次发现动孢菌属放线菌具有生物合成羊毛硫肽类抗生素的能力。
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遗传育种与生物合成2018, 43(4): 429-436.Enopeptin A是一种缩酚酸肽类化合物，具有抗菌、抗病毒等生物活性。以本实验室保藏的链霉菌SIIA-H7264为出发菌，通过紫外(UV)照射、甲基磺酸乙酯(EMS)诱变、亚硝基胍(NTG)诱变以及常压室温等离子体(ARTP)诱变，获得1株高产突变株A-21，其发酵产物Enopeptin A的产量较出发菌株提高了3倍。对发酵条件、发酵培养基组分进行单因素及响应面优化试验，最终Enopeptin A的产量达到1750μg/mL，较初始工艺提高了2.98倍。
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遗传育种与生物合成2018, 43(4): 437-443.纽莫康定B0是棘白菌素类化合物，其半合成衍生物卡泊芬净已被美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于治疗无效或无法耐受其他抗真菌药的患者的侵袭性曲霉病。然而，通过发酵产生的纽莫康定B0的效价较低，限制了卡泊芬净的工业生产。本研究将优化好的的培养基进行了改良，添加了4种前体物质。研究结果表明，大豆油、亮氨酸、异丁醇和甲硫氨酸显著影响发酵单位；进一步的正交试验结果表明，大豆油(A)对纽莫康定B0效价的影响极显著(P<0.05)，亮氨酸(Ｂ)、异丁醇(C)和甲硫氨酸(D)影响次之，最优发酵条件为A2B2C3D2即大豆油6.0g/L，亮氨酸1.0g/L，异丁醇4.0ml/L，甲硫氨酸0.3g/L时，纽莫康定B0发酵单位达到1295mg/L左右。此外，还应用正交试验验证各因素的显着性。当将kLa作为指导参数，使用A315型叶轮的100L发酵罐进行放大和工业规模生产时，与原始效价相比，纽莫康定B0产量增加了361%，并达到了2250mg/mL的水平。
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遗传育种与生物合成2018, 43(4): 444-449.目的 建立秀丽隐杆线虫-产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌感染模型，并利用该模型筛选体内有效治疗阴沟肠杆菌感染的药物。方法 将产碳青霉烯酶的阴沟肠杆菌与线虫共培养，建立线虫-产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌感染模型，选用7种临床常见的抗菌药物(米诺环素、多西环素、庆大霉素、氨曲南、亚胺培南、替加环素和多黏菌素B)对感染后的线虫进行治疗，观察并记录线虫的生存状态，根据线虫的存活率评价不同药物的疗效。结果 产碳青霉烯酶的阴沟肠杆菌能够感染线虫并致其死亡，通过荧光探针标记可见细菌在线虫肠道内定植生长。使用多黏菌素B、替加环素、米诺环素、多西环素治疗后，线虫的生存率与对照组相比显著提高。结论 成功建立了秀丽隐杆线虫-产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌感染模型，并将该模型用于体内抗菌药物活性的筛选。
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分离纯化与化学合成2018, 43(4): 450-456.目的 从雷帕霉素产生菌吸水链霉菌FC904的发酵粗提物中，分离纯化在HPLC图谱中与雷帕霉素相对保留时间(RRT)为0.88的化合物FIM-R24并鉴定其化学结构。方法 采用硅胶柱层析和制备液相分离FIM-R24，并对其进行NMR、UV、IR和HRMS等波谱分析。用SRB测定化合物体外抗肿瘤活性，用沙氏液体培养基二倍稀释法测定化合物的抗真菌活性。结果与结论 FIM-R24的结构为雷帕霉素二醛。FIM-R24的抗肿瘤活性仅比雷帕霉素略低，抗酵母样真菌的活性仅为雷帕霉素的1/8~15。
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分离纯化与化学合成2018, 43(4): 457-461.目的 开发利用离子交换树脂混用技术分离纯化妥布霉素的工艺。方法 建立2,4-二硝基氟苯(DNFB)HPLC柱前衍生化检测妥布霉素及相关物质，以树脂吸附量和解吸量以及妥布霉素纯度为指标，通过静态吸附和动态吸附实验，对妥布霉素在树脂上吸附和解吸条件进行优化。结果 从10种不同类型的树脂筛选出HZ-3C和JK110分离纯化妥布霉素，确定最优工艺条件如下：确定两种树脂最佳比例为3:1，上样pH值为9，上样流速为3BV/h，使用浓度0.20%和0.35%氨水溶液进行梯度洗脱。采用优化后的条件，妥布霉素纯度从32.85%提高到94.82%，回收率为88.26%。结论 建立了一种新的妥布霉素分离纯化方法，优化后的工艺妥布霉素得率高、工艺简单易行，适合工业化生产。
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分离纯化与化学合成2018, 43(4): 462-466.本研究开发出一条以1H-咪唑-5-甲酸(1)为起始原料，经酯化、氨化、酰化、氨解环合和氯代反应合成出2-异丙基-4-氯-咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪(6)的路线，并对合成中关键步骤反应条件进行了优化：酰化、环合和氯代，对各中间体及目标产物6进行了核磁表征，6的总收率为29.2%。该方法操作简便、反应条件温和、原料价廉易得，是合成咪唑并三嗪类的简便合成路线。
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分析质控与制剂2018, 43(4): 467-470.目的 抗菌药磷酸特地唑胺的工艺研究。方法 QbD理念指导工艺研究，以中间体A和焦磷酸四苄酯为原料合成磷酸特地唑胺。结果 以58%的总收率实现了磷酸特地唑胺的制备，HPLC纯度为99.2%。 结论 新开发的工艺反应条件温和，有效地避免了水解杂质、二聚体杂质的产生，保证了磷酸特地唑胺的产品质量。
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分析质控与制剂2018, 43(4): 471-475.目的 确定可口革囊星虫体壁中抗菌物质的最佳酶解工艺。方法 以可口革囊星虫体壁为原料，利用筛选出的木瓜蛋白酶酶解可口革囊星虫体壁蛋白，获得含可口革囊星虫体壁的酶解产物，并用抑菌圈法比较不同条件下酶解产物对大肠埃希菌活性的影响。在单因素试验的基础上，应用四因素三水平正交设计分析法，探讨酶解温度、pH值、酶解时间、加酶量及底物浓度对酶解产物抑菌活性的影响。结论 木瓜蛋白酶最适合水解可口革囊星虫体壁制备抗菌物质，其最佳工艺条件为：底物浓度为4g/L、加酶量为4000U/g、温度为55℃、pH值为8.0的条件下酶解4h，获得平均抑菌圈大小为(15.78±0.5)mm。
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分析质控与制剂2018, 43(4): 476-481.目的 制备了一种新型多柔比星纳米载药胶束。方法 通过开环聚合合成两亲性高分子聚合物聚乳酸-甲氧基聚乙二醇(PLA-mPEG)；通过左旋的聚乳酸(PLLA)与右旋的聚乳酸(PDLA)之间的空间立构复合作用形成空间立构复合物mPEG-PLLA/mPEG-PDLA。并由两亲性分子的自组装作用形成胶束，包载阿霉素并在体外模拟载药胶束在体内的释放情况。结果 PLA-mPEG聚合物由1H NMR和红外波谱表征，通过差示扫描量热法(differential scanning calorimetry, DSC)与X射线衍射(X-ray diffraction, XRD)确证立构复合结构的形成。通过动态光散射测定空白胶束为(80±28)nm与载药胶束的粒径(160±63)nm，通过芘探针法测定胶束的临界胶束浓度(critical micelle concentration, CMC)为6.6mg/L。测得阿霉素立构复合纳米胶束的载药量为4.54%。结论 通过空间立构复合作用形成的胶束，比单一聚乳酸均聚物形成的胶束的CMC更低，载药量更高，稳定性更好。
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药理与临床2018, 43(4): 482-486.目的 研究mazEF基因在肠球菌临床分离株的分布特征，并探讨其与肠球菌耐药的相关性。方法 收集包头地区2013年1月—2016年12月临床来源的肠球菌187株，随机选出90株作为实验菌株，采用聚合酶链反应(PCR)法及基因测序技术检测mazEF基因，VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定及药敏系统鉴定肠球菌并同步测定10种抗菌药物(氨苄西林、青霉素、四环素、替加环素、左氧氟沙星、环丙沙星、万古霉素、利奈唑胺、高水平庆大霉素和红霉素)最低抑菌浓度(minimal inhibititory concentration, MIC)，分析mazEF基因在肠球菌基因组中的分布及与耐药之间的关联。结果 90株肠球菌属，mazEF基因在肠球菌属基因组的阳性率为86.7%。在对氨苄西林、左氧氟沙星、青霉素、四环素、高水平庆大霉素、红霉素、环丙沙星和万古霉素耐药的肠球菌中，mazEF基因阳性率分别为88.7%、86.2%、89.1%、84.6%、81.5%、85.0%、89.4%和60.0%，敏感的肠球菌中，mazEF基因阳性率分别83.7%、87.5%、82.6%、92.0%、94.4%、100.0%、87.1%和88.2%，耐药株和敏感株中，mazEF基因阳性率无统计学差异(P>0.01)。结论 mazEF基因在肠球菌基因组中分布的阳性率为86.7%(78/90)，其分布与对氨苄西林、左氧氟沙星、青霉素、四环素、高水平庆大霉素、红霉素和环丙沙星耐药无显著相关性，与天然耐万古霉素也无显著相关性。
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药理与临床2018, 43(4): 487-491.目的 分析本院送检标本培养出产吲哚金黄杆菌患者的临床特点及耐药情况。方法 采集2013年11月—2017年10月本院住院部所有标本培养出产吲哚金黄杆菌的患者49例的病历资料进行回顾性分析；采集2008年1月—2017年10月本院住院部所有产吲哚金黄杆菌培养阳性标本249例的药敏结果，选取非重复的122例进行耐药性分析。结果 49例患者均伴有严重基础疾病，送检前均使用过广谱抗生素，其中43例有侵入性操作，39例曾入住重症监护室(Intensive Care Unit, ICU)，仅复方磺胺甲噁唑(甲氧苄啶/磺胺甲噁唑)体外耐药率＜50%。结论 (1)本院分离的产吲哚金黄杆菌呈现多重耐药；(2)临床检出产吲哚金黄杆菌的患者多存在严重基础疾病、有广谱抗生素使用史、侵入性操作史、入住ICU史；(3)产吲哚金黄杆菌毒力较弱，本院常见定植。
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药理与临床2018, 43(4): 492-496.目的 研究体外诱导多黏菌素耐药肺炎克雷伯菌的适合度代价，并分析耐药株的分子特性。方法 采用体外诱导方法将临床分离的3株多黏菌素敏感肺炎克雷伯菌诱导成多黏菌素耐药株；微量肉汤稀释法检测体外诱导耐药前后菌株对临床常用抗菌药物的最低抑菌浓度(minimal inhibititory concentration, MIC)；采用PCR方法检测多黏菌素耐药相关基因pmrA、pmrB、mgrB、phoP和phoQ，并对阳性片段进行测序比对分析；对诱导耐药菌株及其对应敏感菌株进行生长曲线分析、生物膜形成能力检测及体外竞争和抗血清试验，分析研究多黏菌素耐药肺炎克雷伯菌的适合度代价。结果 3株诱导耐药株中均检出pmrB(T157P)突变，在诱导株FK713R和FK729R携带的mgrB基因中分别检出ISkpn14和IS5like插入序列。诱导耐药株与敏感株相比，24h生长曲线未发现明显差异；生物膜形成能力检测结果发现诱导耐药株与敏感株生物膜形成能力无明显差异；3株菌获得多黏菌素耐药后均表现出一定程度的体外竞争缺陷，竞争指数(CI值)分别为0.01、0.54和5×10-4；3株诱导耐药菌中有2株(FK713R和FK729R)与其敏感菌相比出现抗血清作用增强现象。结论 肺炎克雷伯菌获得多黏菌素耐药后会出现一定的适合度改变，不同的耐药机制可能会引起不同的适合度表现。
