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2018年 43卷 1期
出版日期:2018-01-25

论文
 
       论文
1 肠道菌群与健康、疾病和药物作用的影响
刘昌孝
肠道菌群作为人体内一个复杂的微生态系统,在维持人体微生态的稳态中,肠道菌群在维持宿主生理功能具有上非常重要的作用,也对许多代谢性疾病、免疫性疾病以及肿瘤都有着密切的关系,且对于药物治疗合理安全有效具有重要意义。本文从正视存在人体的细菌的有益性和有害性、肠道菌群与健康和寿命、肠道菌群与疾病以及药物作用的影响等4方面分析和讨论。肠道菌群与不同类型药物的关系已经成为近些年的热点研究领域,本文分别讨论免疫治疗、化学药物、抗生素和中药的相关问题,希望为认识药物治疗过程、科学合理用药、认识药物作用机制、新药研究开发等研究有所参考。
2018 Vol. 43 (1): 1- [摘要] ( 218 ) HTML (1 KB)  PDF (2702 KB)  ( 2537 )
15 国内外抗耐药复方抗生素研发的现状及开发策略
拱梅芳 付四海*
细菌耐药导致β-内酰胺类抗生素临床使用严重受限,β-内酰胺酶抑制剂与该类抗生素合用有效解决了这一难题。近年来,欧美在新复方抗生素研发方面发展迅速,尤其是近两年FDA先后快速批准了两个新的β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方抗生素,分别为ceftolozane/三唑巴坦(商品名:zerbaxa)和头孢他啶/阿维巴坦(商品名:avycaz),很大程度的缓解了目前耐药菌无药可用的局面。我国药企基于已有的β-内酰胺类抗生素和β-内酰胺酶抑制剂进行较多探索研究,目前已有多家药企在复方抗生素的开发中投入了大量研究。本文阐述了国内外复方抗生素研发情况、政策法规对研发内容的要求、政府对抗耐药菌抗生素研发的鼓励政策,分析国内复方抗生素研发的不足并提出开发建议,为国内合理开发该类抗生素提供参考。
2018 Vol. 43 (1): 15- [摘要] ( 234 ) HTML (1 KB)  PDF (2426 KB)  ( 1160 )
22 以FK506结合蛋白52为靶点的高通量药物筛选模型的建立及应用#br#
栗若兰1 赵峰1 徐岩1 王欣荣2 郑海州1 苟小军2 路新华1 张雪霞1 褚以文2,* 郑智慧1,*
目的    发现新的FKBP52抑制剂类药物,建立以人FKBP52为靶点的高通量药物筛选模型。方法    通过大肠埃希菌表达系统重组表达FKBP52蛋白,并进行纯化。基于FKBP52的肽基-脯氨酰顺反异构酶(peptidyl-prolyl cis-trans isomerase, PPIase)的活性特性,建立FKBP52高通量药物筛选体系。对本公司化合物库中的31558个放线菌及真菌次级代谢产物粗提物进行筛选。结果    成功构建重组表达菌株BL21(rosetta)/pET-30a/FKBP52。纯化后的重组表达人FKBP52蛋白纯度大于90%,并具有很好的PPIase活性。阳性药FK506能剂量依赖地抑制FKBP52活性,IC50为12.035ng/mL。筛选得到121个抑制率大于80%的样品,其中11株放线菌的次级代谢产物中含FK506,6株放线菌的次级代谢产物中含FK520,7株放线菌的次级代谢产物中含雷帕霉素。对随机抽取的100块96孔板筛选数据进行统计,模型的信号/本底比平均值为2.35±0.26,Z'因子平均值为0.78±0.1。结论    本研究成功建立了人FKBP52抑制剂高通量药物筛选模型,该方法具有快捷、灵敏度高、稳定性好的特点,不仅可以快速进行新FKBP52抑制剂的筛选,还可以实现对FKBP52已知抑制剂如FK506、FK520和雷帕霉素等产生菌的定向筛选。
2018 Vol. 43 (1): 22- [摘要] ( 114 ) HTML (1 KB)  PDF (2471 KB)  ( 552 )
28 基因组信息指导下茂源链霉菌代谢产物研究
王珊珊 郭文强 何宁 齐欣 解云英*
目的    在基因组信息指导下,研究茂源链霉菌Streptomyces mobaraensis US-43的代谢产物。方法    采用16S rRNA基因序列分析对菌株US-43进行初步分类鉴定,应用antiSMASH分析菌株US-43的基因组序列并预测其可能含有的代谢产物;采用正向硅胶柱色谱、凝胶柱色谱以及高效液相色谱等分离技术对该菌株的代谢产物进行分离纯化,利用核磁共振和质谱鉴定化合物结构;通过改变培养条件对其发酵稳定性进行考察,通过HPLC-UV方法建立标准曲线,研究代谢产物的产量。结果    在基因组信息指导下从茂源链霉菌Streptomyces mobaraensis US-43中分离鉴定了一个α-吡啶酮类化合物杀粉蝶菌素A1,且该菌株的发酵稳定性良好,最高产量为144mg/L。结论    茂源链霉菌Streptomyces mobaraensis US-43能够稳定产生杀粉蝶菌素A1。
2018 Vol. 43 (1): 28- [摘要] ( 115 ) HTML (1 KB)  PDF (2485 KB)  ( 535 )
35 PTP1B抑制活性真菌F956的鉴定和代谢产物研究
霍培元 徐岩# 林洁 李业英 郑海洲 沈文斌 任晓 石英 崔晓兰 郑智慧 路新华* 张雪霞
目的    研究PTP1B抑制活性真菌菌株F956及其代谢产物。方法    通过形态观察及ITS序列系统发育分析鉴定活性菌株F956;对其发酵产物进行分离纯化获得单体化合物并通过综合波谱解析确定代谢产物的化学结构。对得到的化合物进行分子对接及PTP1B抑制活性评价。结果    F956鉴定为Mucor fragilis(易脆毛霉);从其代谢产物中得到2个具有PTP1B抑制活性的化合物F956-5和F956-6,其中F956-5与化合物JBIR-12相同,F956-6为JBIR-12的13位羟基甲基化衍生物,分子对接结果显示F956-6可占据PTP1B的活性位点;其对PTP1B的IC50分别为7.12和13.92μg/mL。 结论    化合物F956-5(JBIR-12)和F956-6由易脆毛霉产生及其对PTP1B的抑制活性均为首次报道。
2018 Vol. 43 (1): 35- [摘要] ( 78 ) HTML (1 KB)  PDF (2441 KB)  ( 494 )
40 产非达霉素药用植物内生放线菌N12W0304的分类鉴定#br#
丁彦博 穆云龙 霍培元 单越琦 徐岩 路新华﹡ 张雪霞﹡
目的    对一株分离自药用植物仙鹤草中的产非达霉素菌株N12W0304进行分类研究。方法    通过形态特征、培养特征观察、生理生化特征、胞壁分析及16S rDNA序列分析等多相分类研究对菌株进行鉴定。结果    菌株N12W0304属于游动放线菌属(Actinoplanes sp.)菌株。结论    本报道是首次从仙鹤草中分离到游动放线菌属非达霉素产生菌。
2018 Vol. 43 (1): 40- [摘要] ( 99 ) HTML (1 KB)  PDF (2490 KB)  ( 487 )
46 常压室温等离子体诱变选育替考拉宁高产菌株
任林英 张祝兰* 唐文力 王德森 杨煌建 邱观荣 连云阳*
目的    为选育替考拉宁的高产菌株。方法    采用常压室温等离子体(ARTP)技术对替考拉宁产生菌Actinoplanes teichomyceticus FIM-68的孢子进行诱变,诱变处理的孢子悬液涂布在含替考拉宁致死浓度的培养基平板上培养,获得替考拉宁抗性突变株,通过摇瓶发酵对替考拉宁抗性基因突变株进行筛选。结果    获得一株遗传性状稳定的替考拉宁高产菌Actinoplanes teichomyceticus FIM-68-66菌株,其产替考拉宁能力提高了2倍。结论    这是首次报道采用常压室温等离子体诱变技术有效提高替考游动放线菌产替考拉宁能力,所获得的替考拉宁高产菌株可望用于替考拉宁的工业化生产。
2018 Vol. 43 (1): 46- [摘要] ( 108 ) HTML (1 KB)  PDF  (0 KB)  ( 110 )
51 运用高通量筛选技术优化红霉素A发酵的合成培养基
廖建国 洪铭 储炬*
目的    设计并优化出一种适用于红霉素发酵的合成培养基。方法    利用单因素缺失实验设计来减少培养基组分,然后利用Plackett-Burman实验设计来优化组分浓度。上述实验都是采用高通量方法进行的。结果    最初选取了38种与生长和次级代谢相关的物质;然后通过2次单因素缺失实验将培养基组分减少到了19种;最后通过Plackett-Burman实验对19种组分的浓度进行了进一步优化,确定各物质的浓度。5L罐发酵结果表明本研究获得的优化后合成培养基生成的红霉素A产量是采用现有文献报道合成培养基得到红霉素A产量的13.6倍。结论    高通量筛选技术是一种快速有效的筛选方法,该方法适合于优化培养基的组分。采用本论文中得到合成培养基可以对红色糖多孢菌的胞内代谢特征和红霉素A合成的关键代谢因素进行深入分析,利用这些代谢特点和影响代谢的关键因素,本文可以更加理性地对红霉素A的发酵过程进行调控,进而提高工业红霉素A产量并降低生产成本。
2018 Vol. 43 (1): 51- [摘要] ( 106 ) HTML (1 KB)  PDF (2481 KB)  ( 602 )
59 多黏菌素E类似物的纯化和结构鉴定
吴勇 周梦漪 薛春佳 冯军*
目的    对硫酸多黏菌素中的低含量成分进行纯化和鉴定。方法    利用两次反相色谱纯化制备得到单组份,并通过Nα-(2,4-二硝基-5-氟苯基)-L-丙氨酰胺(Nα-(2,4-Dinitro-5-fluorophenyl)-L-alaninamide, FDAA)试剂衍生法研究组分的组成氨基酸及其构型。基于二级质谱和氨基酸组成的结果对化合物进行了结构鉴定。结果    多黏菌素E2的氨基酸组成、分子量与文献报道一致;杂质3和杂质9结构中含有L-Leu残基和羟基化的脂肪酸链;杂质6含有L-Val残基。结论    杂质3、杂质6和杂质9分别为3-OH-E2、Val-E2和3-OH-E1。
2018 Vol. 43 (1): 59- [摘要] ( 83 ) HTML (1 KB)  PDF (2450 KB)  ( 676 )
64 Box-Behnken响应面法优化去氧氟尿苷缓释片处方及其体外释放机制研究
赵科 刘源# 赖可 任静*
目的    响应面法优化去氧氟尿苷骨架片处方,并进行体外释放机制研究。方法    以羟丙甲纤维素(HPMC K4M)为骨架材料,结合其他辅料混合均匀,以直接压片法制备去氧氟尿苷骨架缓释片。通过Box-Behnken响应面法(Box-Behnken design-response surface methodology, BBD-RSM)对处方进行优化,研究优化处方的体外释药规律,并进行数学模型拟合。结果    优化处方的去氧氟尿苷骨架缓释片体外释放性能良好,可持续释药24h,药物释放符合Ritger-peppas模型。结论    通过BBD-RSM建立的模型可用于去氧氟尿苷骨架缓释片的处方优化,优化处方达到去氧氟尿苷缓释骨架片设计要求。
2018 Vol. 43 (1): 64- [摘要] ( 71 ) HTML (1 KB)  PDF (2516 KB)  ( 533 )
69 浊度法抗生素效价测定仪的校准技术及其应用#br#
丁峰元
根据浊度法抗生素效价测定仪的工作原理和结构组成,编制了校准方法并研制相应的校准设备。使用数字温度计可实现仪器控温性能的温度偏差、温度均匀度和温度波动度等3个技术指标的校准,以上3个技术指标分别为±1.0℃、1.0℃和±0.5℃。使用光谱中性滤光片可实现仪器吸光度测量性能的零点漂移、示值漂移、示值误差、测量重复性和通道差异等5个技术指标的校准,以上5个技术指标分别为±0.005、±0.005、±0.03、0.005和0.03。经验证,校准方法有效,可确保浊度法抗生素效价测定仪测量结果的溯源性和可比性。
2018 Vol. 43 (1): 69- [摘要] ( 67 ) HTML (1 KB)  PDF (2364 KB)  ( 682 )
73 超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨液质联用解析泰地罗新注射液中的有关物质
严凤1 周哲2 黄家莺1 潘娟1 曹莹1 李丹妮1 张婧1 吴剑平1 顾欣1,*
目的    本方法建立了超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用(UHPLC-Q Exactive)分析注射用泰地罗新中的有关物质。方法    采用(Zorbax SB-C18, 100mm×3.0mm, 1.8μm) 色谱柱,以0.1%三氟乙酸溶液(A)-0.1%三氟乙酸乙腈溶液(B)为流动相,0.3mL/min线性梯度洗脱分离;采用全扫描及自动触发二级质谱扫描的功能测定。采集有关物质的质谱母离子及子离子谱,并进行解析,推测有关物质的结构。结果    在所建立的条件下,泰地罗新及其有关物质之间分离良好,检测出12个有关物质,并对其进行结构解析。结论    建立的Q Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱法能有效地分离分析泰地罗新及其有关物质,为注射用泰地罗新的质量控制和工艺优化提供了参考。
2018 Vol. 43 (1): 73- [摘要] ( 111 ) HTML (1 KB)  PDF (2549 KB)  ( 446 )
80 不同剂型硝酸咪康唑微生物限度检查方法适用性研究与评价
李辉1 杨晓莉1 梁泽梅2 秦亚红3 绳金房1
目的    通过不同的前处理方式,建立硝酸咪康唑不同剂型的微生物限度检查法。方法    参照《中国药典》2015年版四部,根据硝酸咪康唑胶囊剂、散剂和乳膏剂的理化特点,选择均质、萃取和静置等前处理方式,采用平皿法和薄膜过滤法建立适用于硝酸咪康唑不同制剂的微生物限度检查方法,并比较方法差异。结果    建立的3种不同剂型硝酸咪康唑的微生物限度检查方法满足《中国药典》2015年版要求,需氧菌总数,霉菌和酵母菌总数检查法中的试验菌回收率均在50%~200%之间,加入的控制菌均可检出,各方法适用于不同剂型硝酸咪康唑的微生物限度检查。结论    硝酸咪康唑不同剂型的微生物限度检查方法差异较大,应灵活选择适宜的前处理方式,解决样品抑菌性的去除和难于过滤的问题。
2018 Vol. 43 (1): 80- [摘要] ( 81 ) HTML (1 KB)  PDF (2399 KB)  ( 595 )
85 碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌分子流行病学及耐药机制
姚欣 冯莉 朱艮苗*
目的    研究碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌分子流行病学及对碳青霉烯类耐药机制。方法    KB法筛选对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌临床分离株24株,同时采用微量肉汤稀释法测定这些细菌的最低抑菌浓度,改良Hodge实验检测碳青霉烯酶;PCR检测碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaIMP、blaNDM、blaVIM、blaIMI、blaSPM、blaNDMOXA-23、blaNDMOXA-24、blaNDMOXA-48和blaNDMOXA-58)。结果    药敏试验显示碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌具有多重耐药性。PCR扩增碳青霉烯酶基因,blaIMP阳性率为58.3%,经测序为IMP-4,其余均为阴性。结论    肺炎克雷伯菌临床分离株对碳青霉烯类抗生素的耐药机制主要与产IMP-4金属酶有关。
2018 Vol. 43 (1): 85- [摘要] ( 94 ) HTML (1 KB)  PDF (2498 KB)  ( 456 )
91 ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌生长及生物膜形成的影响#br#
陈晓青1 李可可1 余甜1 谢跃1 邹凤梅2 陈玉芊2 李军春2 魏莲花2,*
目的    研究ε-聚赖氨酸(ε-poly-L-lysine, ε-PL)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, S. aureus)生长及生物膜形成的影响。方法    以金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC25923及社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)USA300为试验菌株,常量肉汤稀释法(试管)测定最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC),酶标仪检测吸光度法观察各株金黄色葡萄球菌的生长曲线,96孔板结晶紫染色法检测各株菌生物膜的形成并用扫描电子显微镜(SEM)观察生物膜的形成情况。结果    ε-PL对ATCC25923和USA300的MIC均为31.25mg/mL。ε-PL浓度升高时对两株菌生长的抑制作用随之增强。1/2MIC ε-PL能显著降低ATCC25923和USA300生物膜的形成能力。 结论    ε-PL作为一种安全、高效的天然防腐剂,能有效抑制金黄色葡萄球菌细菌的生长及生物膜的形成,为新型药物的研发提供了理论依据。
2018 Vol. 43 (1): 91- [摘要] ( 87 ) HTML (1 KB)  PDF (2515 KB)  ( 429 )
96 伊曲康唑治疗口腔念珠菌病安全性与有效性的系统评价#br#
陈昭燕 占美 田方圆 徐珽*

摘要:目的    系统评价伊曲康唑与其他抗真菌药(克霉唑、氟康唑、酮康唑及特比萘芬)相比治疗口腔念珠菌病的临床疗效与安全性,以期为临床提供循证参考。方法    计算机检索PubMed、EMbase、Medline、the Cochrane Library、中国生物医学文献数据库、中国知网、维普数据库和万方数据库。检索时间均从建库到2017年6月。搜集伊曲康唑治疗口腔念珠菌病的随机对照试验(randomized controlled trials, RCTs),采用RevMan 5.3统计软件进行Meta分析。结果    共纳入8项RCT,共计892例患者。Meta分析结果显示:(1)临床治愈率:伊曲康唑组与氟康唑组[RR=0.82, 95%CI(0.62, 1.10), P=0.19]、克霉唑组[RR=1.05, 95%CI(0.87, 1.26), P=0.63]相比临床治愈率差异均无统计学意义;但伊曲康唑组临床治愈率(65.9%)显著高于特比萘芬组(33.3%)。(2)真菌学治愈率:伊曲康唑组与氟康唑组相比,真菌学治愈率差异无统计学意义[RR=0.87, 95%CI(0.75, 1.01), P=0.07]。(3)复发率:伊曲康唑组与氟康唑组相比,复发率差异无统计学意义[RR=0.85, 95%CI(0.51, 1.40), P=0.52]。(4)不良反应发生率:伊曲康唑并不会增加主要胃肠道不良反应[RR=1.10, 95%CI(0.59, 2.05), P=0.77],其他不良反应发生率差异亦无统计学意义。结论    伊曲康唑治疗口腔念珠菌病的有效性和安全性与其他抗真菌药物无显著差异。然而,由于纳入文献质量偏低,提供的信息有限,尚需大规模和高质量的RCT进一步验证。
2018 Vol. 43 (1): 96- [摘要] ( 65 ) HTML (1 KB)  PDF (2484 KB)  ( 464 )
103 阿奇霉素和支扩养阴颗粒联合给药对大鼠支气管扩张模型的影响及机制#br#
张邦禹1,2 赵兰3 徐瑛1,4,*
目的    本实验研究了阿奇霉素和支扩养阴颗粒联合给药大鼠对支气管扩张的影响,并探讨其可能机制。方法    SD雄性大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、阿奇霉素1d组、阿奇霉素3d组、阿奇霉素1d+支扩养阴颗粒3.6g/kg组、阿奇霉素+支扩养阴颗粒7.2g/kg组、阿奇霉素1d+支扩养阴颗粒14.4g/kg组及支扩养阴颗粒7.2g/kg组。采用向气管灌注铜绿假单胞菌液造成大鼠支气管扩张模型;检测大鼠气道酚红排泌量和肺组织病理切片Masson染色来观察阿奇霉素和支扩养阴颗粒联合给药大鼠对支气管扩张的影响;检测肺组织TNF-α免疫组化染色和肺组织匀浆炎症因子TNF-α、IL-1β含量来探讨其机制。 结果    阿奇霉素和支扩养阴颗粒联合给药能够降低支气管扩张大鼠气道酚红排泌量。阿奇霉素和支扩养阴颗粒联合给药能够降低支气管扩张大鼠肺组织炎症因子TNF-α、IL-1β含量,同时能够降低支气管扩张大鼠肺组织胶原纤维面积。结论    阿奇霉素和支扩养阴颗粒联合应用治疗支气管扩张症优于阿奇霉素单药治疗,其机制与降低肺组织炎症因子TNF-α、IL-1β含量有关。
2018 Vol. 43 (1): 103- [摘要] ( 75 ) HTML (1 KB)  PDF (2498 KB)  ( 547 )
109 口卫士新型亮白健齿片活性与质量的研究#br#
李宇茜 孙嘉茵 熊小平 樊淑宏 罗婷婷 徐小平*
目的    评价口卫士亮白健齿片祛牙斑、抑菌和安全性和建立本品的质量控制方法。方法    采用陈旧性牙斑牙为模型,测试祛牙斑的清除力;采用金色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎双球菌和白念珠菌为菌种,验证本品的抑菌能力;采用急毒验证其安全性;采用分光光度法分别测定醋酸氯苯胍葶和过碳酰胺的含量。结果    亮白健齿片可在刷洗约2min后逐渐除去色斑牙的色斑,随着刷洗次数增多,色斑清除越明显;对金色葡球菌和大肠埃希菌的最低抑菌浓度(minimal inhibititory concentration, MIC)为6.25μg/mL;最大给药量18g/kg;醋酸氯苯胍葶和过碳酰胺分别在5.50~17.40μg/mL和0.12~0.45mg/mL范围内线性关系良好,线性方程分别为y=0.0508x-0.0729(R²=0.9993)和y=1.7245x+0.0185(R²=0.9991),醋酸氯苯胍葶的重复性和中间精密度分别为0.65%和0.72%,平均回收率为99.60%;过碳酰胺的重复性和中间精密度分别为0.29%和0.41%,平均回收率为100.4%。结论    口卫士亮白健齿片不仅能清除牙釉质表面色素沉着,抑制口腔细菌,且质量稳定,安全性良好。
2018 Vol. 43 (1): 109- [摘要] ( 101 ) HTML (1 KB)  PDF (2472 KB)  ( 509 )
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