摘要：目的 对海洋真菌Aspergillus sp. HNMF-114发酵提取物的抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)活性成分进行研究。方法 应用正反相硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析、薄层层析、高效液相色谱制备等方法，对该菌株发酵提取物进行分离纯化；结合核磁共振波谱(NMR)和质谱(MS)等数据解析化合物的结构；并对化合物的体外PTP1B抑制活性进行评价。结果 从真菌Aspergillus sp. HNMF-114的发酵产物中分离得到了9个化合物，其结构分别鉴定为CS-B(1)，norquinadoline A(2)，tryptoquivaline U(3)，quinadoline B(4)，glyantrypine(5)，5,5'-二甲基-7-羟基-4,4',7'-三甲氧基-6,8'-双香豆素(6)，altenuene(7)，4(3H)-喹唑啉酮(8)和7-羟基-4-甲氧基-5-甲基香豆素(9)。结论 化合物2、5和6在50 µg/mL浓度下对PTP1B具有一定抑制效果，为发掘新型PTP1B抑制剂提供数据参考。

摘要：目的 建立氨基戊二烯环脂肽类化合物(APD-CLDs)基因簇携带菌株的筛选策略，从实验室建立的放线菌菌种库中筛选并分析APD-CLDs基因簇携带菌株。方法 采用PCR技术结合基因组扫描，成功筛选出7株携带APD-CLDs基因簇的放线菌，并对这些菌株进行了基因组测序和分析。结果 基因组分析结果表明，Micromonospora sp. FIM99-461、Micromonospora sp. FIM030746、Micromonospora sp. FIM060002、Micromonospora sp. FIM090374和Streptomyces sp. FIM18-1089菌株中存在与rakicidins生物合成基因簇，而Streptomyces sp. FIM15-0361和Streptomyces sp. FIM16-0599菌株的APD-CLDs基因簇则表现出一定的差异。模式菌株基因组服务器(TYGS)分析揭示，FIM16-0599、FIM18-1089和FIM99-461等3株为放线菌潜在新种。此外，在菌株FIM99-461、FIM03-0746、FIM06-0002和FIM09-0374菌株的发酵液中检测到了rakicidin A。结论 建立了高效的APD-CLDs基因筛选策略，获得了多株APD-CLDs基因簇携带菌株。研究为APD-CLDs的生物合成研究和新药开发提供了新的资源，也为微生物次级代谢产物的筛选提供了新的方法和思路。

目的 研究一株分离自长白山林下凋落物的长白黄微孢菌Parametarhizium changbaiense SGSF125的代谢产物及其抗菌活性。方法 采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析及半制备高效液相色谱等方法，分离纯化该菌株发酵产物；通过核磁和质谱数据的分析及文献对比的方法鉴定化合物结构；采用微量稀释法评价抗细菌和抗真菌活性。结果 从发酵提取物中分离到8个化合物，分别是3β-hydroxy-(22E, 24R)-ergosta-5,8,22-trien-7-one (1)、melithasterol B (2)、1,1'-oxybis(2,4-di-tert-butylbenzene) (3)、3-(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl) propionic acid (4)、(3R, 5R)-3-hydroxy-5-decanolide (5)、4-hydroxybenzaldehyde (6)、methyl 2-(4-hydroxyphenyl)acetate (7)和2-hydroxybenzoic acid (8)。化合物4对格特隐球菌Cryptococcus gattii 3271 G1具有抑菌活性，其MIC值为32 μg/mL。结论 从提取物中分离获得1个具有一定抗格特隐球菌活性的化合物4。

目的 针对耐药铜绿假单胞菌，寻找抗生素的替代疗法，从污水样品中分离烈性噬菌体对其进行鉴定，研究其生物学特性和基因组特征，并探索其在体内外抗菌活性。方法 以铜绿假单胞菌临床分离株7-61-29作为宿主菌，从污水样品中分离烈性噬菌体，对其进行鉴定、生物学特性测定、基因组测序分析、体外抑菌和抗生物被膜活性测定，以及采用小鼠肺部感染模型测试其体内抗菌活性。结果 从污水中分离出一株烈性肌尾噬菌体vB_PaeM_SIIA-P1，全基因组分析表明其为线状双链DNA，大小为65881 bp。最佳感染复数为1，裂解周期为80 min，潜伏期为20 min，暴发量为41 PFU/cell。体外实验显示12 h后对照组A600上升至1.1，加入噬菌体的实验组处于0.1左右，表明噬菌体vB_PaeM_SIIA-P1在体外对铜绿假单胞菌有良好的抑菌活性。同时与对照组相比加入噬菌体后均显著降低了铜绿假单胞菌生物被膜的产生。在小鼠感染模型中，与感染对照组相比，给予噬菌体治疗显著提高了存活率，30 h后噬菌体治疗组小鼠存活率为100%，小鼠肺组织中的细菌数量显著降低，由1.75×109 CFU/g降低到了9.2×107 CFU/g，病理切片显示噬菌体治疗后的肺组织结构更为完整，损伤程度更低。结论 分离到1株新的铜绿假单胞菌肌尾噬菌体vB_PaeM_SIIA-P1，在体内外均表现出良好的抗耐药铜绿假单胞菌活性。

摘要：目的 本研究采用经典的纯培养技术勘探西藏阿里沙漠土壤放线菌及其抗菌潜力，为高海拔沙漠放线菌资源的开发利用提供参考，同时为新抗生素研发提供菌株资源。方法 采集象泉河和狮泉河流域沙漠样品共38份，通过稀释涂布法和三线法进行放线菌的分离和纯化；根据分离菌株的16S rRNA基因序列相似度比对和构建系统进化树，进行物种初步鉴定和新颖性分析；采用PCR技术对代表菌株进行次级代谢产物生物合成基因(PKSⅠ、PKSⅡ和NRPS)检测，并结合菌属类别，挑取发酵菌株进行抗菌活性检测。结果 采用8种分离培养基从38份样品中共分离得到648株放线菌，分布于9目16科36属，其中13株为潜在新物种；185株代表菌株中174株的次级代谢产物生物合成基因扩增结果为阳性，同时具有3种生物合成基因的菌株有46株。选取52株发酵菌株进行抗菌活性研究，获得24株阳性菌株，其中14株为链霉菌，10株为稀有放线菌。链霉菌PX32-12对多种病原菌具有较强的抗菌活性，糖丝菌RX49-8对耻垢分枝杆菌表现出极强的拮抗活性。结论 阿里沙漠土壤中放线菌资源丰富，具有从中发现稀有放线菌、放线菌新物种及优质药用放线菌的潜力，值得深入研究。

摘要：目的 质谱导向对海洋蓝灰异壁放线菌Actinoalloteichus cyanogriseus LHW52806的次级代谢产物及其抗炎症性肠病和抗菌活性进行研究。方法 利用质谱引导对化合物进行定向追踪分离纯化，通过理化常数测定、波谱数据比对等对化合物的结构进行鉴定；采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)构建斑马鱼炎症性肠病模型，评价化合物的抗炎症性肠病活性；采用微量肉汤稀释法对化合物进行了抗菌活性评价。结果 分离了吡啶类生物碱6个和β-咔啉类生物碱1个，分别鉴定为caerulomycinonitrile(1)、caerulomycin A(2)、caerulomycin B(3)、caerulomycin C(4)、caerulomycin I(5)、7-O-methyl caerulomycin R(6)、marinacarboline C(7)。活性评价结果表明化合物5和6有较强的抗炎症性肠病活性，分别在20和10 μmol/L有效减少斑马鱼肠道的炎症细胞聚集迁移数量。结论 本研究从海洋蓝灰异壁放线菌Actinoalloteichus cyanogriseus LHW52806中分离出具有抗炎症性肠病活性的次级代谢产物，展示了海洋微生物在药物开发中的潜力，为抗炎症性肠病药物开发提供了新的候选分子。

摘要：目的 筛选能够响应咔唑两亲性抗菌剂CB29的Staphylococcus aureus肽聚糖水解酶(peptidoglycan hydrolase，PGH)，原核表达并纯化重组PGH，测定其抗菌活性。方法 用酶谱法筛选能响应CB29的PGH，设计His标签融合表达序列，以pET28a(+)为出发质粒，通过酶切、酶连构建重组表达质粒，在Escherichia coli中诱导表达。冻-融法结合超声波法破碎细胞，通过镍柱、超滤及透析法纯化和复性PGH。采用SDS-PAGE和高效液相色谱-质谱鉴定目标PGH。利用肉汤微量稀释法测定PGH最低抑菌浓度。结果 在S. aureus中检测到3种随CB29浓度升高而出现明显酶活性条带的蛋白，分子量分别为51、62和85 kDa。经质谱鉴定分别为糖苷酶(Glc)、酰胺酶(Ami)和细胞壁结合蛋白SpA。通过序列分析确定了62 kDa中311个氨基酸的Ami核心功能序列，据此构建了表达载体pET28a-rAmi(recombinant Amidase，rAmi)。rAmi以包含体形式获得表达，经细胞破碎、镍柱分离纯化并透析复性后得到浓度为578 μg/mL的活性蛋白。抑菌效果测定显示，50 μg/mL纯化的rAmi对S. aureus和耐甲氧西林S. aureus抑制率分别为95%和93%。结论 重组PGH原核表达质粒可高效表达rAmi，成功纯化并验证了其体外抗菌活性，为深入研究其在抗菌治疗中的作用以及开发新型抗菌剂奠定了基础。

摘要：目的 对海洋来源链霉菌OUCMDZ-2582的吲哚咔唑类次级代谢产物及其抑菌活性进行研究。方法 采用A1液体培养基对菌株进行发酵，乙酸乙酯提取发酵产物；以吲哚咔唑的特征紫外吸收为导向，利用正反相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱以及半制备高效液相色谱定向分离纯化发酵产物中的吲哚咔唑生物碱；综合运用LC-MS、核磁共振、旋光等鉴定所分离化合物的化学结构；采用微量肉汤稀释法测试化合物对人体致病菌和农业致病菌的抑制活性。结果 从链霉菌OUCMDZ-2582发酵产物中分离到9个吲哚咔唑生物碱，其结构分别鉴定为十字孢碱(1)、3'-N-乙酰十字孢碱(2)、3'-N-氨基甲酰十字孢碱 (3)、TAN-1030A (4)、链霉咔唑C(5)、K252b(6)、3'-N-acetylholyrine A(7)、3'-N-acetyl-3-hydroxyholyrine A(8)和K252c(9)。化合物2和3对副溶血弧菌以及化合物3对溶藻弧菌有抑菌活性，MIC值均为32 μg/mL。结论 黄河三角洲来源的链霉菌OUCMDZ-2582富产吲哚咔唑生物碱，其中化合物2和3有抑菌活性。

摘要：目的 探究海洋无脊椎动物军舰翼蓑海蛞蝓共附生细菌的多样性、新颖性及其次级代谢产物的活性，为新型抗菌活性产物的发掘储备菌种资源。方法 基于6种分离培养基，利用稀释涂布法对采集于中国南海的军舰翼蓑海蛞蝓进行共附生细菌的分离，纯化后的菌株通过PCR扩增和测序，比对16S rRNA序列进行菌株多样性和新颖性分析；以菌株新颖性和分类为选择依据，挑选了66株共附生细菌进行发酵和提取，对提取到的次级代谢产物粗提物开展抗菌、抗生物膜以及抗大型海洋污损生物的活性筛选。结果 共分离鉴定出细菌729株，分布在7个纲、27个目、43个科、105个属。5株细菌对至少1株致病菌表现出抗菌活性；12株细菌对至少1株致病菌表现出抗生物膜活性；5株细菌对草苔虫幼虫的附着具有良好的抑制作用。3类生物活性筛选结果显示，共21株共附生细菌的次级代谢产物具有抗菌、抗生物膜或抗草苔虫附着的活性。结论 海洋无脊椎动物军舰翼蓑海蛞蝓的共附生细菌的多样性丰富，具有从中发现新活性次级代谢产物的潜力，值得深入研究。

摘要：目的 对云南省普洱市江城县的10个地衣来源内生真菌的多样性进行勘探，旨在丰富地衣内生真菌的多样性，并为特境微生物来源活性先导分子的发现提供菌种资源。方法 本文利用内转录间隔区(ITS)序列测定和在NCBI基因库中进行BLAST比对分析，对分离出的真菌进行初步鉴定，然后对真菌的发酵产物进行抗菌和抗肿瘤细胞活性测试。结果 本文从地衣中共分离得到130株内生真菌，并对它们的固体发酵提取物进行活性筛选，其中24株具有抗菌活性，5株具有显著的抗胰腺癌细胞MIA paca2活性。结论 本研究进一步丰富了地衣内生真菌的种类，同时，抗菌活性及抗肿瘤细胞活性菌株的发现为挖掘特殊生境来源真菌的活性次级代谢产物提供了菌株资源。

摘要：目的 研究链霉菌Streptomyces sp. CPCC 203679的活性次级代谢产物，分析其次级代谢产物生物合成基因簇，并挖
掘其产生次级代谢产物的潜力。方法 通过正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和半制备HPLC等方法进行分离纯化。
利用质谱、核磁共振波谱等技术进行化合物的结构鉴定。利用Illumina HiSeq测序技术对菌株CPCC 203679进行基因组测序，
采用antiSMASH(v7.1.0)在线工具分析其次级代谢产物生物合成基因簇。对大环内酯类化合物进行抗病毒和抗菌活性测试。结
果 从链霉菌CPCC 203679发酵液中分离鉴定了4个化合物，分别为： 勃利霉素A(1)、勃利霉素F(2)、5'-脱氧-5'-甲硫肌苷(3)、
环(L-丙氨酸-L-异亮氨酸)二肽(4)。化合物1和2显示良好的抗甲型流感病毒活性，IC50值分别为2.4和4.7 μmol/L，化合物1还显
示一定的抗革兰阳性菌和抗结核分枝杆菌活性。全基因组测序显示，菌株CPCC 203679的基因组序列全长8,055,535 bp，平均
(G+C)含量为72.58%，共编码7507个基因，预测到44个生物合成基因簇。结论 从链霉菌Streptomyces sp. CPCC 203679中分离得
到2个活性良好的大环内酯类化合物，并首次报道了勃利霉素类大环内酯的抗甲型流感病毒、抗艾滋病病毒和抗结核分枝杆菌
的活性。该菌株具有丰富的次级代谢产物生物合成基因簇，具有进一步挖掘新的次级代谢产物的价值。

摘要：目的 对鱼腥草内生链霉菌Streptomyces sanglieri GZWMJZ-725的次级代谢产物及α-葡萄糖苷酶抑制活性进行研
究。方法 采用大米固体培养基对菌株进行发酵；采用有机溶剂对发酵产物进行提取；利用正反相柱色谱手段对提取物进行分
离纯化；综合运用高分辨质谱、核磁共振波谱、紫外、红外等现代波谱技术对化合物平面结构进行解析；采用计算圆二色谱法
确定化合物的立体构型；采用pNPG法测试化合物的α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果 从S. sanglieri GZWMJZ-725发酵产物中分离
到3个化合物，其中化合物1和2鉴定为新的protoasukamycin类似物，化合物3为protoasukamycin。化合物1~3对α-葡萄糖苷酶的半
数抑制浓度(IC50)分别为(10.08±0.09)、(10.71±0.18)和(11.14±0.18) μg/mL，阳性对照阿卡波糖的IC50为(140.78±1.98) μg/mL。
结论 鱼腥草内生链霉菌S. sanglieri GZWMJZ-725可产生结构新颖且具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的protoasukamycin类化合物。

摘要：目的 研究刺五加内生链霉菌(Streptomyces amritsarensis)13-85的次级代谢产物。方法 采用大孔吸附色谱、葡聚
糖凝胶柱色谱、半制备高效液相等方法分离纯化菌株13-85的次级代谢产物，结合质谱和核磁共振波谱等方法确定化合物的结
构；最后采用倍比稀释法评价化合物抗菌活性。结果 从链霉菌Streptomyces amritsarensis 13-85中分离得到2个新化合物和14个
已知化合物，分别为：溶藻链霉苷A(1)、溶藻链霉苷B(2)、omicsynin A4(3)、环(L-脯−L-酪)(4)、环(D-脯−L-酪)(5)、环(L-酪−L-
酪)(6)、环(L-酪−L-缬)(7)、N−乙酰色氨酸(8)、环(甘−L-色)(9)、环(L-色−L-丙)(10)、(1S,3S)−1−甲基−1,2,3,4−四氢−咔啉−3−羧酸
(11)、(1R,3S)−1−甲基−1,2,3,4−四氢−咔啉−3−羧酸(12)、环(L-异亮−L-脯)(13)、环(L-异亮−D-脯)(14)、环(L-亮−L-脯)(15)、环(L-亮
−D-脯)(16)。其中化合物3对枯草芽孢杆菌的MIC为50 μg/mL。结论 从Streptomyces amritsarensis 13-85中发现了两个新的鼠李
糖酯苷，该研究结果丰富了链霉菌次级代谢产物的结构类型。

摘要：目的 本文对链霉菌Streptomyces sp. FIM18-327发酵液中的次级代谢产物进行研究。方法 采用浸提、萃取、硅胶
柱层析及制备HPLC等方法分离纯化次级代谢产物，其结构经MS、NMR波谱数据分析并与文献对比来确定。结果 从该菌株发
酵液中分离纯化得到6个化合物，均为吲哚并咔唑类生物碱，其结构分别鉴定为7-ethyl-UCN-01(1)、RK-1409(2)、RK-286C(3)、
星孢菌素(4)、7- methoxy-RK-286C(5)、K252c(6)。结论 化合物1~6均是首次从该菌株中分离获得，其中化合物1是新的天然产
物，活性结果表明化合物1~3对人源乳腺癌细胞MCF-7和胃癌细胞NCI-N87的抑制活性较好，其IC50值为0.14~2.29 μmol/L；同时
也发现它们对激酶PKCθ也具有很强的抑制活性，其IC50值为IC50值为0.19~60.9 nmol/L。该研究结果对丰富吲哚并咔唑类生物碱
的种类、发现候选抗肿瘤药物等具有指导意义。

摘要：目的 评价新一代大环内酯类药物可利霉素(carrimycin, CAM)对堪萨斯分枝杆菌(Mycobacterium kansasii，MK)的
体内外抗菌活性，旨在为治疗堪萨斯分枝杆菌引起的感染提供更多选择。方法 选取MK标准株(ATCC12478)和3株临床分离
株作为研究菌株，通过微孔板显色法(microplate alamar blue assay, MABA)测定CAM、螺旋霉素(spiramycin, SPM)、阿奇霉素
(azithromycin，AZM)和利福平(rifampicin，RIF)的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)；棋盘法测定CAM与AZM
和RIF等8种临床常用治疗药物的体外作用；评估CAM、SPM、AZM在J774A.1细胞中的抗菌活性；建立BALB/c小鼠感染堪萨斯
分枝杆菌的模型，并通过CFU计数评估空白对照组、CAM治疗组、AZM治疗组和SPM治疗组小鼠脏器活菌数，苏木精-伊红染
色法(HE染色)评价CAM治疗组小鼠肺组织病变程度。结果 CAM、SPM、AZM和RIF在MK标准株(ATCC12478)和3株临床分离
株中测定的MIC值分别为4~8 mg/L、>64 mg/L、4~8 mg/L和0.125~0.25 mg/L。8种临床常用治疗药物和CAM在体外未出现拮抗
作用(fractional inhibitory concentration index， FICI<4)，CAM和异烟肼、利福平等药物具有部分协同作用。在巨噬细胞J774A.1
感染MK实验中，和对照组相比2 mg/L CAM、SPM和AZM处理48 h均能使J774A.1细胞内MK降低 0.3~0.4 lgCFU(P<0.001)。
在感染中等剂量MK的BALB/c小鼠模型中给与100 mg/kg药物进行治疗，与空白对照组相比CAM、AZM和SPM治疗2周小鼠
肺组织中活菌数分别降低了0.73、0.69和0.22 lgCFU(P<0.001)，治疗4周小鼠肺组织中活菌数分别降低了0.74、1.02 和0.41
lgCFU(P<0.001)。在感染高剂量MK的BALB/c小鼠模型中，与空白对照组相比100 mg/kg CAM治疗4周小鼠肺组织中活菌数降低
了0.98 lgCFU(P<0.001)，HE染色结果显示CAM治疗显著降低了小鼠肺组织中炎症细胞数量(P=0.001)。结论 CAM对MK具有较
好的体内外抗菌活性，可以显著降低肺组织活菌数，减轻肺组织炎症程度，值得进一步开展临床研究。

摘要：目的 利用链霉菌Streptomyces sp. TRM76323的基因组序列信息，分析其次级代谢产物生物合成基因簇并预测其代
谢产物，为发现潜在新抗生素奠定基础。方法 采用Illumina Novaseq对TRM76323菌株进行全基因组测序，结合antiSMASH、
CARD、OrthoFinder、Peppan软件进行基因组分析，进行代谢潜力、抗性基因和基因组差异预测，为指导新的微生物来源的天
然产物的发现提供重要的理论指导，并利用现代分离技术获得代谢产物。结果 TRM76323菌株的基因组序列由7,338,911 bp组
成，G+C含量为72.1%，共31个生物合成基因簇，有糖肽类耐药等抗性基因、分离获得化合物β-羰基-1H-吲哚-3-丙醛、环二肽和
邻苯二甲酸二丁酯。结论 柽柳根际土壤链霉菌Streptomyces sp. TRM76323有丰富的次级代谢产物生物合成基因簇，能产生多
种次级代谢产物，具有进一步发掘新抗生素的价值。

摘要: 目的 对1株西藏来源链霉菌10-37的次级代谢产物进行研究。方法 在分子网络指导下，利用HW40 C凝胶柱、
Flash快速液相分离制备色谱仪、半制备型高效液相色谱等方法对化合物进行分离纯化，运用核磁共振、高分辨液质联用技术对
单体化合物进行结构鉴定，最后利用微量肉汤稀释法进行抗菌活性测定。结果 从链霉菌10-37的菌丝体提取物中分离得到了4
个代谢产物，包括2个新化合物oxazolomycin A3(1)和A4(2)，以及2个已知化合物oxazolomycin A2(3)和oxazolomycin B(4)。其中
化合物1和2为化合物3的一对几何异构体，它们三烯部分的构型分别为(4’E，6'E，8'E)(1)、(4’Z，6'E，8'E)(2)、(4’Z，6'Z，8'E)
(3)、(4’E，6'E，8'E)(4)。结论 西藏特境的地理优势结合分子网络分析的策略，可以更高效地挖掘新结构次级代谢产物。