糖肽类抗生素(glycopeptide antibiotics，GPAs)在临床上广泛用于治疗革兰阳性菌引起的严重感染性疾病。然而，随着传统糖肽类抗生素对作用靶点的偏移，细菌细胞壁增厚，肽聚糖链间交联减少，全球多重耐药菌的不断涌现，亟需挖掘新型糖肽类抗生素来突破这一困境。本文系统梳理糖肽类抗生素主要耐药机制及核心改造策略的研究进展，为新型糖肽类抗生素的研发提供参考。

由于细菌对抗微生物药物耐药性的出现以及新抗生素研发进展缓慢，亟需开发抗生素替代疗法。噬菌体凭其安全性高、环境污染小等显著优势成为热门替抗药物且备受关注。现阶段已开发出噬菌体药物的喷雾制剂、液体制剂、片剂、微胶囊剂、乳剂等不同剂型。临床上可根据需求情况选择不同剂型及其特定的给药方式以最大程度发挥噬菌体药物靶向治疗的特点。但噬菌体治疗尚处于初期发展阶段，各种制剂的制造和使用标准并未完善制定，故本文总结噬菌体药物各类剂型的特点、各种给药方式的不同以及噬菌体疗法在临床转化上的技术难点，并对噬菌体药物的未来发展进行了展望。

抗菌药物耐药性(antimicrobial resistance，AMR)已对全球卫生医疗体系构成了严峻挑战，主要原因是抗生素的不合理使用及非靶向用药导致病原体耐药性的不断产生与传播。基于传统检测技术的抗菌药物敏感性试验(antimicrobial susceptibility testing，AST)方法耗时且费力，因此开发快速且准确的新型表型药敏检测方法对于指导临床治疗各种类型细菌感染显得尤为重要。本文主要综述了临床微生物实验室中已商业化的快速表型AST平台及在研新型平台的研究与应用进展，描述了其检测技术、性能特征、适用样本类型、检测时间以及这些快速检测技术驱动的临床影响，并对未来微生物药敏检测技术发展方向进行展望。

随着多重耐药革兰阴性菌增多，尤其以耐碳青霉烯肠杆菌上升更为明显，给临床治疗带来挑战，头孢他啶/阿维巴坦作为一种新型酶抑制剂，逐渐被临床应用，作为耐碳青霉烯革兰阴性菌的常用治疗药物，但在应用过程中仍存在一些问题，故本文就头孢他啶/阿维巴坦对耐碳青霉烯革兰阴性菌所致感染的临床应用研究进展做一综述，包括肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等，同时也总结其在肺部、血流、腹腔、尿路、颅内等不同感染部位的临床应用研究进展，为临床合理使用提供依据。

目的 对1株北极海绵共附生放线菌Streptomyces somaliensis 1107的次级代谢产物进行研究。方法 综合运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和半制备高效液相色谱(HPLC)等方法对发酵产物进行分离纯化，通过核磁共振波谱(NMR)、高分辨电喷雾电离质谱(HR-ESI-MS)、结合文献比对等方法对化合物进行结构鉴定，采用微量肉汤稀释法对化合物进行了抗菌活性评价。结果 在放线菌S. somaliensis 1107的乙酸乙酯萃取物中获得4个吲哚生物碱类化合物，包括1个新化合物(+)-anthranoside C-4′-O-α-D-glucopyranoside(2)，1个新天然产物(+)-anthranoside C(1)，2个已知化合物1-(3-indolyl)-2, 3-dihydroxypropan-1-one(3)和tryptophol(4)。活性评价结果表明，化合物1对菌株烟草青枯病原茄科雷尔菌GM11000和丁香假单胞菌DC3000有一定抑制活性，最小抑菌浓度(MIC)均为32 μg/mL。结论 北极海洋放线菌S. somaliensis 1107能产生具有抗菌活性的生物碱类化合物，为极地海洋天然产物的多样性研究及其高值化开发利用提供科学依据。

目的 探索Streptomyces qinglanensis 1678与Talaromyces sp. 1116共培养，对增加次级代谢产物产生的相互促进作用。方法 基于Talaromyces sp. 1116对S. qinglanensis 1678的抑制作用，结合S. qinglanensis 1678的基因组测序和antiSMASH结果，使用共培养技术挖掘其活性次级代谢产物；利用高效液相色谱(HPLC)和硅胶柱层析分离纯化共培养提取物，采用核磁共振(NMR)和质谱(MS)技术鉴定次级代谢产物的结构，最后评估其抑菌活性。结果 从共培养发酵粗提物中分离获得8个活性次级代谢产物，包括聚酮类化合物enterocins(1)、5-deoxyenterocin(2)、sattahipmycin(3)与fumagillin(8)，生物碱类化合物tryprostatins A(4)和fumitremorgin C(5)，以及聚酮-氨基酸杂合类代谢物pseurotin A(6)与其11-羟基甲基化衍生物11-O-methylpseurotin A(7)。抗菌活性数据显示，化合物3具有较强抗革兰阳性菌活性，最小抑菌浓度(MIC)为0.125 μg/mL。结论 S. qinglanensis 1678与Talaromyces sp. 1116之间存在拮抗作用，通过共培养技术，可成功激活两株菌中沉默基因簇的表达，挖掘出具有生物活性的次级代谢产物。

目的 从广西北部湾涠洲岛和钦州海域采集的动植物及生物膜样品中分离真菌，从中发现活性次级代谢产物。方法 采用10倍稀释法通过3种培养基分离样品中的真菌，采用两种培养基发酵后进行化学成分分析，并采用现代色谱分离技术(Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱)对选取菌株的次级代谢产物进行分离纯化，通过MS、NMR等方法进行对化合物结构鉴定，并采用CCK-8法对化合物测试了细胞毒活性。结果 从北部湾海洋来源的31个动植物样品和8个生物膜样品中共分离得到222株真菌，从Curvularia sp. MDCW-1060中分离获得3个间苯二酸内酯衍生物，分别鉴定为zeaenol(1)、5E-7-oxozeaenol(2)和5Z-7-oxozeaenol(3)。细胞毒活性结果显示，化合物3对人肝癌细胞HepG2的IC₅₀为2.0 μmol/L，对L02人正常肝细胞无细胞毒性。结论 化合物3具有对肝癌细胞具有细胞毒性。北部湾真菌资源是抗肿瘤药物开发的潜在来源。

目的 通过分子生物学和菌落形态学特征鉴定1株曲霉属真菌NTSY.01并检测其代谢产物对临床常见致病菌的抑菌活性。方法 ①PCR扩增内转录间隔区(Internal Transcribed Spacer, ITS)和β-微管蛋白(β-tubulin, TUBB)基因并进行测序，运用BLAST在线软件进行序列比对。②采用改良的琼脂塞和双层琼脂扩散实验，以临床常见致病菌金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC 25922、鲍曼不动杆菌ATCC 17978、铜绿假单胞菌ATCC 27853、粪肠球菌ATCC 29212、铅黄肠球菌ATCC 700327和肺炎克雷伯菌ATCC 700603为指示菌研究NTSY.01代谢产物的抑菌活性。③采用K-B法测定菌株NTSY.01发酵过滤浓缩液的抑菌活性。结果 菌株NTSY.01的ITS基因序列与Aspergillus sp., A. ochraceopetaliformis, A. flocculosus, A. pulvericola, A. insulicola和A. sp. r089的ITS基因序列均100%同源性。其β-tubulin基因序列只与A. ochraceopetaliformis NRRL 35055的β-tubulin基因序列(GenBank: EF661351)100%同源。结合菌落特征确定菌株NTSY.01为曲霉属真菌A. ochraceopetaliformis (A. ochraceopetaliformis)。其代谢产物对铜绿假单胞菌ATCC 27853、粪肠球菌ATCC 29212、铅黄肠球菌ATCC 700327和肺炎克雷伯ATCC 700603均无抑菌活性，对鲍曼不动杆菌ATCC 17978、大肠埃希菌ATCC 25922和金黄色葡萄球菌ATCC 25923均表现出抑菌活性，对临床分离的62株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii, CRAB)、1株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistance Staphylococcus aureus, MRSA)和2株耐碳青霉烯类大肠埃希菌(carbapenem-resistan Escherichia coli, CREco)亦具有抑菌活性，其中对鲍曼不动杆菌抑菌活性最强。结论 发现并鉴定1株曲霉属真菌A. ochraceopetaliformis NTSY.01，其代谢产物对鲍曼不动杆菌表现出强的抑菌活性，可进一步分析鉴定和分离其中的活性成分，为CRAB感染提供新的治疗策略。

目的 建立硝酸咪康唑栓的体外溶出度测定方法，并应用该方法对不同厂家市售产品的溶出行为进行评价。方法 采用 《中国药典》2020年版四部0931第二法(桨法)，使用自制沉降篮将栓剂沉至溶出杯底部，溶出介质为1000 mL pH4.5醋酸-醋酸钠缓冲液(含2.0% SDS)，温度37 ℃，转速100 r/min。采用高效液相色谱法测定，300 min时硝酸咪康唑的溶出量应不低于60%。色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C₁₈(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流动相为1.5%乙酸铵-甲醇-乙腈(20: 40: 40)，流速为1 mL/min，检测波长为230 nm，进样体积为20 μL，柱温为30 ℃。结果 在该条件下空白辅料无干扰，硝酸咪康唑在0.9504~237.6 μg/mL浓度范围内线性关系良好(r>0.999)，回收率为101.8%~103.7%(n=9)，RSD<2.0%，准确度高。结论 该方法操作简便、检测灵敏度高、重现性好，能有效区分不同企业、不同批次的硝酸咪康唑栓的溶出行为，测定条件合理，适用于硝酸咪康唑栓的溶出度测定。

目的 探讨高毒力肺炎克雷伯菌(highly virulent Klebsiella pneumonia, hvKP)的鉴定方法及其分子流行病学特征，同时检测hvKP常见毒力基因和管家基因，分析不同hvKP菌株的基因同源性。方法 收集暨大一附院2017—2024年期间71株临床疑似hvKP菌株，采用拉丝试验联合检测毒力基因rmpA、aerobactin鉴定hvKP菌株，并用大蜡螟幼虫致死试验对上述两种方法联合检测的准确性进行验证；采用PCR扩增技术检测常见的18种毒力基因，采用多位点序列分型技术检测7个管家基因并对PCR产物进行测序比对，确定每株hvKP的基因型，分析不同菌株的基因同源性。结果 71株菌株的拉丝试验均表现为阳性(拉丝长度>5 mm)；aerobactin和rmpA毒力基因检出率均为100%；大蜡螟幼虫致死试验显示：用10⁶ cfu/mL浓度hvKP菌悬液注射虫体后，大蜡螟幼虫表现为72 h内100%死亡；71株hvKP毒力基因携带率100%的分别为aerobactin、rmpA、ycfM、entB，其他毒力基因的携带率分别如下：magA 39% (28/71)，wcaG 69% (49/71)，ureA 94% (67/71)，alls 68% (48/71)，mrkD 94% (67/71)，fimH 99%(70/71)，kpn 73% (52/71)，kfu 54% (38/71)，irp-1 79% (56/71)，irp-2 83% (59/71)，ytbs 79% (56/71)，fyuA 77% (55/71)，uge 90%（64/71)，wabG 96% (68/71)。痰液中hvKP以ST2861为主，血液和脓液中hvKP均以ST23型为主，肝脓肿穿刺物中hvKP则以ST65型为主。ICU病房中以ST2861为主，呼吸病房以ST2861和ST23型，消化病房以ST23、ST65、ST828型为主。结论 拉丝试验联合aerobactin和rmpA毒力基因检测能够准确检出hvKP菌株，aerobactin、rmpA、ycfM、entB是最常见的毒力基因，不同标本类型来源的hvKP基因型不同，个别病房存在hvKP的克隆传播。

目的 通过分析hsp60基因分型与碳青霉烯耐药阴沟肠杆菌(CRECC)多重耐药趋势的关联性，揭示不同遗传簇的耐药特性及临床分布差异，并探讨其分子流行特征，为临床精准诊疗和院内感染防控提供科学依据。方法 收集2021—2023年间徐州医科大学附属医院碳青霉烯耐药阴沟肠杆菌的药敏实验结果，联合mCIM/eCIM法和PCR扩增测序鉴定碳青霉烯酶基因(如bla_NDM、bla_KPC等)及其他β-内酰胺酶基因；采用MLST分型明确菌株的序列型(ST)。通过hsp60基因检测及系统发育树分析对菌株进行遗传簇分型。利用WHONET 5.6和SPSS 26.0进行耐药率统计及组间差异分析，探究hsp60分型与耐药表型及临床分布的相关性。结果 共分离出45株非重复CRECC，综合ICU分离率最高(60%)，标本以痰液为主(64.4%)，对β-内酰胺类、喹诺酮类高度耐药；对氨基糖苷类药物阿米卡星、替加环素、多黏菌素敏感率较高；所有菌株均携带bla_NDM基因(bla_NDM-1占95.5%)，其他β-内酰胺酶基因主要为bla_SHV-12(18/45)、bla_CTX-M-1(9/45)；MLST分型共获得13种，以ST171(37.7%)和ST418(35.5%)为主；hsp60分型以簇Ⅵ为主(77.7%)，并且所有ST171和ST418均分布于该簇，簇Ⅵ的临床分布具有显著偏好性，其在呼吸道及血流感染中占主导地位。接合试验证实耐药基因可通过质粒水平传播。 结论 徐州地区CRECC以簇Ⅵ(ST171/ST418)为主，其多重耐药性与NDM型碳青霉烯酶及质粒转移密切相关。hsp60分型可作为MLST的有效补充，精准识别临床优势亚种，为院内感染溯源及防控提供依据。阿米卡星、替加环素和多黏菌素仍是治疗CRECC的有效选择，建议医疗机构针对优势耐药克隆加强监测，并优化感染防控策略以阻断传播链。

目的 探讨携带bla_NDM-1基因碳青霉烯耐药奇异变形杆菌(carbapenem-resistant Proteus mirabilis, CRPM)的分子特征和耐药机制。方法 研究收集2017—2024年浙江省两家三级甲等医院的CRPM临床分离株，所有菌株通过MALDI-TOF MS进行物种鉴定，并通过全基因组测序确认；应用PCR检测碳青霉烯酶耐药基因；采用微量肉汤稀释法检测药物敏感性，接合实验验证携带碳青霉烯耐药基因质粒转移性；并通过全基因组测序，结合MLST、多序列比对、SNP分析和系统发育树构建，分析其遗传背景。结果 本研究共鉴定出9株携带bla_NDM-1基因的CRPM菌株，这些菌株对碳青霉烯类、第三和四代头孢菌素及头孢菌素/β-内酰胺酶合剂高度耐药，但对头孢德罗和氨曲南/阿维巴坦敏感。4株携带bla_NDM-1基因的质粒可成功转移至大肠埃希菌J53。MLST分析发现ST135为主要克隆型。系统进化分析将菌株划分为3个主要分支，显示种群内遗传多样性显著。结论 本研究系统描绘了浙江地区bla_NDM-1阳性CRPM的耐药特征及可传播潜力，为NDM型碳青霉烯酶监测、感染控制及新型治疗策略提供了分子依据。

目的 分析临床分离的耐氟康唑热带念珠菌UPC2与ERG11基因表达及突变的关联性，探讨两种基因与唑类药物耐药的相关性。方法 收集2016—2024年成都医学院第一附属医院临床分离的712株非重复热带念珠菌，随机抽取氟康唑耐药菌35株和敏感菌25株。采用VITEK MS质谱仪联合ATB FUNGUS 3试剂盒进行菌种鉴定和药敏试验；利用实时荧光定量PCR(qRTPCR)检测热带念珠菌ERG11和UPC2基因mRNA相对表达水平；进一步对ERG11与UPC2表达水平同时升高的耐药菌株进行编码区测序分析。结果 712株热带念珠菌中，氟康唑耐药率总体约20%，其中2018年与2022年耐药率显著升高，分别达43.75%与40.00%。qRT-PCR结果显示，耐药组ERG11和UPC2基因mRNA相对表达水平显著高于敏感组(P<0.001)。测序结果显示，在12株耐氟康唑热带念珠菌ERG11中，检测到两个高频错义突变位点Y132F与S154F，且两突变共存；而在相应耐药菌株的UPC2基因上未发现有效的功能获得性突变。结论 热带念珠菌对唑类药物耐药率较高，其对唑类药物的耐药与ERG11和UPC2基因过度表达或ERG11基因Y132F、S154F错义突变相关。研究UPC2与ERG11基因的关系，可为临床监测热带念珠菌耐药性提供新的分子标记物。

目的 脑膜炎败血伊丽莎白菌(Elizabethkingia meningoseptica，EM)是一类引起新生儿脑膜炎、菌血症和败血症等感染和继发感染的医院获得性感染病原体，具有多重耐药特性且致死率高。本研究初步探索了EM临床分离株FMS-007中β-内酰胺类抗生素的耐药机制，为EM菌的临床治疗及新药研发提供依据。方法 基于EM临床分离株FMS-007的全基因组序列，经候选耐药基因筛选及药敏分析，筛选出β-内酰胺类抗生素耐药基因bla_Blab-1(EM)[其表达产物为BlaB-1(EM)]，整合质谱解析与分子虚拟对接技术，阐明其耐药分子机制及其关键功能位点。结果 bla_Blab-1(EM)可介导氨苄西林、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、头孢唑林、头孢呋辛及头孢噻肟耐药，其核心作用在于BlaB-1(EM)对β-内酰胺环的解环作用。进一步筛选到6个关键功能位点，其突变后完全失活。结论 本研究探究了bla_Blab-1(EM)介导EM耐药的分子机制，为EM菌耐药机制的深入研究及新型β-内酰胺酶抑制剂研发提供精准靶点；同时建立的“基因筛选-功能验证-位点鉴定”技术体系，为未知耐药基因功能解析提供了高效研究范式，也为EM感染的临床精准治疗与耐药防控具有重要指导意义。

目的 研究环丙沙星衍生物对口腔致病菌变形链球菌(Streptococcus mutans)抗菌和抗生物膜活性及其潜在的作用机制。方法 采用微量肉汤稀释法测定环丙沙星衍生物的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration，MIC)、最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration，MBC)及生物膜抑制率。采用吸光度法测定环丙沙星衍生物的时间-杀菌曲线，探究不同浓度的环丙沙星衍生物对变形链球菌生长的影响；采用结晶紫染色法对变形链球菌生物膜进行定量分析；测定铁离子的浓度对化合物抗生物膜活性的影响；测定环丙沙星衍生物对生物膜胞外聚合物(extracellular polysaccharides, EPS)和活性氧(reactive oxygen species, ROS)的影响；测定环丙沙星衍生物对变形链球菌产酸的影响；采用扫描电镜观察环丙沙星衍生物对变形链球菌在羟基磷灰石表面黏附的影响；结果 化合物4对变形链球菌的MIC为6.71 μmol/L，MBC为13.74 μmol/L。化合物4能在24 h内抑制细菌的生长。化合物4在1/4×MIC亚抑制浓度下减少53.6%生物膜的形成。机制研究表明环丙沙星衍生物抑制变形链球菌生物膜EPS的形成，增加细菌ROS的产生，干扰变形链球菌对铁离子的摄取。羟基磷灰石实验表明化合物4能显著减少细菌在羟基磷灰石表面黏附，抑制细菌聚集成团，促进细菌在表面分散。结论 环丙沙星衍生物既能有效地杀灭变形链球菌，又能在亚抑制浓度抑制生物膜的形成，其机制可能与减少EPS的形成，增加ROS的产生，促进细菌生物膜分散及干扰细菌铁摄取有关。因此，环丙沙星衍生物对于临床上治疗变形链球菌生物膜感染具有潜在的应用价值。

目的 探究植物提取物芦丁、杨梅素及橙皮苷对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，PA)群体感应(quorum sensing，QS)系统的抑制作用，为植物抑菌剂的开发提供参考。方法 采用倍比稀释法测定芦丁、杨梅素及橙皮苷对PA(ATCC27853)的最小抑菌浓度(MIC)，绘制生长曲线观察其抑菌活性，并分别利用结晶紫染色法、脱脂牛奶平板法及双层琼脂扩散法，观察亚抑菌浓度的植物提取物对PA生物膜的形成、对PA胞外蛋白酶的产生及对PA运动能力的影响，分析其对PA菌QS系统的抑制作用。结果 芦丁、杨梅素及橙皮苷对PA的MIC分别为2.500、2.500和1.250 mg/mL。橙皮苷抑制生物膜作用最强，芦丁对胞外蛋白酶的抑制作用最强(但随时间延长抑制减弱)，杨梅素和芦丁对运动能力的抑制作用强于橙皮苷。结论 亚抑菌浓度的芦丁、橙皮苷及杨梅素对PA菌QS系统所调控的细菌毒力相关表型有不同程度的抑制作用。

抗生素耐药细菌和抗性基因(antibiotic resistance genes, ARGs)可在废水、粪污、土壤等自然环境体系中维持并传播，抗生素耐药性问题(antimicrobial resistance, AMR)已从临床环境扩展为全球环境风险问题。同一健康(One Health)视野下的AMR防控强调关注人类、动物与环境界面中的联通生态过程。本文围绕AMR生态基础与微生物干预策略，系统论述合成菌群、捕食性微生物、噬菌体及基因工程等手段在降低耐药微生物定植、破坏生物膜和遗传元件清除等方面的防控作用，并讨论生态干预微生物资源的获取方式。未来AMR防控应进一步结合高通量筛选、单细胞分析与多组学分析等手段，从表型与基因型识别活跃的耐药性防控资源，解析其作用靶点与群落互作机制，构建高效、可控的AMR生态防控体系。