摘要：目的 分析南极来源嗜冷真菌Pseudogymnoascus sp. OUCMDZ-4032次级代谢产物生物合成基因簇并建立菌株遗传转化体系，为激活菌株沉默基因簇奠定基础。方法 通过antiSMASH网站分析生物合成基因簇。通过抗性筛选，菌丝生长培养基和酶解时间的优化，制备了优质原生质体。利用原生质体吸水涨破，对原生质体进行检测和再生率计算。通过将hph和neo耐药片段导入，对转化系统进行验证。结果 Pseudogymnoascus sp. OUCMDZ-4032基因组中预测存在50个次级代谢产物合成基因簇，而其中36个为孤儿基因簇。菌株在300 μg/mL G418和100 μg/mL潮霉素B的抗性浓度下被抑制，以PDB或SDYS为菌丝生长培养基，混合酶酶解2 h，原生质体达到最大值6.1×106个/mL，再生率是47%±3%。通过PEG介导，将抗性质粒转入原生质体中，共随机挑取十株转化子，阳性率90%。结论 分析了菌株Pseudogymnoascus sp. OUCMDZ-4032的次级代谢产物生物合成基因簇，建立了成熟的遗传转化系统，有利于研究菌株次级代谢产物的生物合成，也为嗜冷微生物的分子生物学研究提供了基础提示。