摘要：目的 通过化学合成获得高纯度断雷帕霉素乙酯化合物样品，并进一步评价其体外生物学活性，解决雷帕霉素终端产品研制过程中可能产生的断雷帕霉素乙酯化合物这一重要杂质的来源问题，从而为雷帕霉素终端产品的研发和质量提供技术保障。方法 通过两步化学反应合成断雷帕霉素乙酯化合物E941，即以雷帕霉素为母体合成断雷帕霉素，再进一步合成断雷帕霉素乙酯化合物E941；化学反应产物经正相硅胶柱层析，以丙酮/正庚烷(1:4, V/V)混合溶剂进行洗脱，得到E941粗品，最后经C₁₈反相制备型高效液相色谱仪进一步分离制备获得E941纯品，HPLC纯度达96.99%；选取不同类型的肿瘤细胞株进一步评价E941的体外抗肿瘤活性，并通过淋巴细胞转化实验评价其免疫抑制活性。结果 通过化学合成和分离纯化制备获得的化合物E941经结构鉴定为断雷帕霉素乙酯化合物，其体外抗肿瘤活性较雷帕霉素低，免疫抑制活性远低于雷帕霉素。结论 通过两步化学合成反应及分离纯化即可制备获得高纯度的断雷帕霉素乙酯化合物，为雷帕霉素制剂等终端产品的质量控制提供杂质对照品及生物学活性数据支持，有利于推动雷帕霉素终端产品的研制。